Isoladores para ensaios de esterilidade: eliminação de falsos positivos nos ensaios de esterilidade previstos nas normas farmacopéicas

Os testes de esterilidade apresentam um modo de falha temido: o falso positivo. O microrganismo foi isolado do produto ou do ambiente de ensaio? Se não for possível determinar isso, terá de enfrentar uma investigação do lote, novos ensaios, uma possível rejeição indevida e um atraso na libertação. A isolador para testes de esterilidade — também conhecido como um isolador para ensaios de esterilidade, isolador para ensaios de esterilidade de controlo de qualidade ou isolador para ensaios assépticos — utiliza uma barreira fechada de classe A para isolar o ensaio do mundo exterior, reduzindo os falsos positivos ambientais para valores próximos de zero. Este guia explica o que é, por que razão elimina os falsos positivos, como é configurado e como supera uma sala limpa aberta ou uma capela laminar.

De onde vêm os falsos positivos — e por que razão são prejudiciais

Um teste de esterilidade consiste em inocular o produto em meios de cultura e incubá-lo para verificar se há crescimento de algum microrganismo. O problema: se o ambiente de trabalho contiver microrganismos, um ambiental o organismo que cai no meio de cultura também cresce — um falso positivo. Quando isso acontece, não é possível provar se a origem foi o produto ou a sala, e as consequências são as seguintes:

• Investigação e novo teste — tempo, custo, libertação diferida;
• Risco de rejeição errada — um bom produto que não teve sucesso, ou recursos de investigação desperdiçados;
• Dúvida quanto à integridade dos dados — a garantia de esterilidade foi posta em causa durante a auditoria.

Portanto, o requisito fundamental dos ensaios de esterilidade é simples: remover “contaminação ambiental” como variável, pelo que um resultado positivo só pode advir do próprio produto.

Por que razão um isolador para testes de esterilidade elimina os falsos positivos

A realização de ensaios numa sala limpa aberta ou numa capela laminar expõe o operador e o produto ao mesmo espaço — a esterilidade depende da técnica humana e o risco aumenta com a presença de pessoas e com o movimento. A isolador para testes de esterilidade segue um caminho diferente: uma barreira física delimita um ambiente fechado de classe A (ISO 5); os operadores trabalham através de portas para luvas e nunca entrar no espaço estéril; e antes de cada ensaio, a câmara é descontaminada com VHP, atingindo uma redução validada de 6 log, eliminando quaisquer resíduos da última execução. O ambiente é controlado de forma sistemática e os falsos positivos diminuem drasticamente. Para mais informações sobre o princípio do VHP, consulte O que é a descontaminação com VHP; para comprovar a redução de 6 log, consulte Como é validado um ciclo VHP.

Como é configurado um isolador para testes de esterilidade

Em que medida é superior a uma sala limpa aberta ou a uma capela laminar

As três abordagens diferem no que diz respeito aos fundamentos da garantia de esterilidade:

• Sala limpa aberta — depende das pessoas e da classificação da sala; apresenta o maior risco de falsos positivos e os custos de funcionamento mais elevados (área limpa, vestuário de proteção, monitorização).
• Capota laminar / RABS — defesa local, melhor do que a aberta, mas ainda assim apresenta brechas e depende da técnica. Ver Isolador vs RABS.
• Isolador para ensaio de esterilidade — descontaminação totalmente fechada e validada, o menor número de falsos positivos, a escolha preferida para testes de esterilidade. Comparação completa entre o método aberto e o fechado: Isoladores assépticos: abertos vs. fechados (PDA TR34).

Conformidade com as normas farmacopéicas e seleção

Os ensaios de esterilidade devem cumprir USP , EP e ChP expectativas em relação ao ambiente de ensaio; uma abordagem baseada em isoladores satisfaz essas expectativas, com uma taxa de falsos positivos mais baixa e uma validação da descontaminação rastreável. Ao escolher um isolador para testes de esterilidade (ou Isolador para ensaios de esterilidade de controlo de qualidade), verifique se a câmara e os sistemas de transferência podem ser configurados de acordo com o volume de amostras e o fluxo de trabalho, e se o ciclo de VHP pode ser desenvolvido e qualificado (ver Como escolher um isolador farmacêutico), e com que facilidade a EM se adapta. Para processos assépticos especiais, como a terapia celular, consulte Isoladores para terapia celular.

Perguntas frequentes

Um isolador para testes de esterilidade elimina totalmente os falsos positivos?
Nenhum sistema garante um zero absoluto, mas uma câmara fechada de Grau A, aliada a uma descontaminação prévia com VHP de 6 log, controla a variável ambiental de forma sistemática, reduzindo os falsos positivos para valores muito inferiores aos de uma sala limpa aberta ou de uma capela laminar.

É o mesmo que um isolador de enchimento asséptico?
A construção é semelhante (tipo fechado de classe A + VHP), mas um isolador para testes de esterilidade está configurado para o fluxo de trabalho de controlo de qualidade — filtração por membrana, inoculação e manuseamento de meios de cultura.

Pressão positiva ou negativa?
Os testes de esterilidade de rotina utilizam pressão positiva para proteger o teste; se a amostra apresentar risco biológico, é necessária pressão negativa ou reversível.

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