Décontamination VHP d’un laboratoire BSL-3 entier : procédure et pièges

Un laboratoire BSL-3 doit être décontaminé avant une maintenance majeure, après un déversement important, lors d’un changement de programme de travail et avant sa mise hors service. Le peroxyde d’hydrogène vaporisé a largement remplacé le formaldéhyde pour cette tâche. Ce guide présente les prérequis avant le premier cycle, le déroulement d’un cycle et les détails à l’origine des échecs.

Points clés

• Le VHP pour salle entière s’utilise avant la maintenance et les changements de filtres, après les déversements, lors des changements de programme et à la mise hors service.
• La salle doit pouvoir être rendue étanche : registres étanches aux bulles au soufflage et à l’extraction, traversées scellées et portes fermant hermétiquement — avec vérification par un essai de décroissance de pression.
• Les postes de sécurité microbiologique et les caissons HEPA d’extraction font partie du plan — traités avec la salle ou séparément — car ils concentrent la contamination la plus élevée.
• Les indicateurs biologiques sont placés là où la vapeur pénètre difficilement : dans les postes, sous les paillasses, derrière les équipements, près des grilles de reprise et dans les angles froids.
• La remise en service exige une concentration de peroxyde inférieure à la limite d’exposition, des résultats négatifs pour tous les indicateurs après incubation, ainsi qu’un système de gestion du bâtiment rétabli et vérifié.

Quand un laboratoire BSL-3 nécessite une décontamination de salle entière

• Avant une maintenance qui ouvre des gaines, des caissons filtrants, des plafonds ou des équipements, afin que les techniciens puissent travailler sans l’ensemble des mesures de confinement.
• Après un déversement ou un rejet important qui ne peut être maîtrisé par une désinfection locale.
• Lorsque le programme de travail change pour un autre agent, ou après une investigation d’épidémie.
• Avant la mise hors service ou l’affectation de l’espace à un autre usage.
• Périodiquement, lorsque l’évaluation des risques de l’installation l’exige.

Le formaldéhyde est utilisé depuis longtemps à cette fin, mais il est classé cancérogène pour l’être humain et laisse des résidus. Le VHP agit à température ambiante, ne laisse aucun résidu et son procédé est contrôlé et enregistré, ce qui explique son utilisation actuelle dans la plupart des laboratoires — voir VHP, formaldéhyde et dioxyde de chlore : comparaison.

Les prérequis du laboratoire

Ces décisions relèvent de la conception. Un laboratoire non conçu pour la décontamination gazeuse nécessite généralement l’ajout de registres, de joints et de raccordements avant que le VHP soit utilisable. Ils doivent donc être pris en compte lors de la mise en service, voir liste de contrôle de mise en service BSL-3. Pour un nouveau laboratoire, voir conception d’un système VHP intégré pour un laboratoire BSL-3.

Postes de sécurité microbiologique et caissons HEPA

L’intérieur d’un poste de sécurité microbiologique de classe II, ses filtres et le plénum situé derrière présentent la contamination la plus élevée du laboratoire. Deux approches sont courantes : traiter le poste séparément avec son propre cycle avant la salle, ou faire fonctionner son ventilateur pendant le cycle de la salle pour que la vapeur traverse les filtres. La seconde ne fonctionne que si le fabricant du poste l’autorise et si les indicateurs placés à l’intérieur le démontrent — voir décontamination VHP des postes de sécurité microbiologique.

Les filtres HEPA d’extraction sont généralement installés dans des caissons à l’extérieur de la salle. Les caissons bag-in/bag-out sont décontaminés en place par leurs vannes avant le changement de filtre, de sorte que le filtre ne soit remplacé qu’après son traitement.

Déroulement du cycle

1. Autorisation et planification. Convenez de la séquence avec le responsable de biosécurité, les services techniques et toute personne travaillant dans les zones adjacentes.
2. Préparez la salle. Retirez les déchets et les matériaux absorbants ; ouvrez les tiroirs, placards et incubateurs ; surélevez si possible les objets posés sur les paillasses.
3. Placez les indicateurs. Indicateurs biologiques et chimiques aux emplacements les plus défavorables : dans chaque poste, sous les paillasses, derrière les congélateurs et centrifugeuses, près des grilles de reprise, dans les angles froids et dans l’antichambre si elle est incluse.
4. Isolez la salle. Fermez les registres étanches aux bulles et scellez les portes ; passez le système de gestion du bâtiment en mode décontamination pour que les alarmes et la régulation de pression réagissent correctement.
5. Injectez la vapeur. Le générateur déshumidifie, injecte et assure le maintien selon le cycle validé, avec des ventilateurs si le brassage l’exige. Les zones adjacentes sont surveillées par des capteurs à faible plage de mesure.
6. Aérez. Conversion catalytique dans la salle ou ouverture contrôlée de l’extraction pour évacuer la vapeur par les filtres HEPA d’extraction, jusqu’à une concentration inférieure à la limite d’exposition — généralement 1 ppm.
7. Autorisez la remise en service. Récupérez les indicateurs ; n’autorisez l’usage prévu de la salle qu’après des résultats négatifs des indicateurs biologiques après incubation, conformément à la procédure de l’installation.

Échecs courants

• Fuites de l’enveloppe. La concentration n’atteint jamais la cible ou du peroxyde est détecté dans le couloir. Effectuez un essai de décroissance de pression et corrigez les fuites avant la tentative suivante.
• Indicateurs positifs dans les postes ou derrière les équipements. Brassage insuffisant ou poste resté fermé. Ajoutez des ventilateurs ou traitez le poste séparément.
• Condensation sur les surfaces froides. Les congélateurs, parois froides ou tuyauteries d’eau glacée provoquent une condensation et une corrosion locales. Arrêtez ou réchauffez les équipements froids si possible et considérez les points froids comme des emplacements les plus défavorables.
• Aération prolongée. Matériaux absorbants laissés dans la salle, comme des cartons ou des documents papier.
• Alarmes et régulation de pression. Un système de gestion du bâtiment qui n’est pas en mode décontamination déclenche des alarmes ou tente de compenser l’étanchéité de la salle.

Le dépannage est abordé plus en détail dans dépannage d’un cycle VHP en échec.

Équipements Fenggu pour cette application

• Stérilisateur VHP mobile pour salles (FG-VHP-M500) — unité sur roues pour des espaces jusqu’à 300 m³.
• Registre d’isolement de biosécurité (FG-LOCK-BCV) — isolement étanche aux bulles des gaines de soufflage et d’extraction.
• Porte étanche à joint gonflable (FG-LOCK-GDI) — pour les salles de confinement et de décontamination.
• Stérilisateur VHP pour BIBO (FG-VHP-BIBO) — conçu pour décontaminer les caissons de filtres HEPA avant le changement de filtre, sous réserve de validation.

Questions fréquentes

Peut-on utiliser le VHP pour décontaminer un laboratoire BSL-3 ?
Oui. Le VHP est aujourd’hui la méthode la plus courante pour décontaminer l’ensemble des salles des laboratoires BSL-3, à condition de pouvoir rendre la salle étanche, isoler le CVC et démontrer le cycle avec des indicateurs biologiques aux emplacements les plus défavorables.

Un laboratoire BSL-3 doit-il être étanche pour le VHP ?
Il nécessite une enveloppe étanche aux gaz permettant de maintenir la concentration de vapeur et d’éviter les fuites vers les zones adjacentes. Un essai de décroissance de pression lors de la mise en service montre si la salle est suffisamment étanche.

Les postes de sécurité microbiologique sont-ils décontaminés avec la salle ?
Parfois. Le poste est traité séparément avant la salle, ou son ventilateur fonctionne pendant le cycle de la salle pour que la vapeur traverse ses filtres — uniquement si le fabricant l’autorise et si les indicateurs intérieurs le démontrent.

Comment la salle est-elle aérée après un cycle VHP ?
Par conversion catalytique dans la salle ou ouverture contrôlée de l’extraction pour évacuer la vapeur par les filtres HEPA d’extraction, jusqu’à une concentration inférieure à la limite d’exposition, généralement 1 ppm.

Pourquoi le VHP a-t-il remplacé le formaldéhyde dans les laboratoires de biosécurité ?
Le formaldéhyde est classé cancérogène pour l’être humain, nécessite une exposition longue et une humidité élevée et laisse des résidus à nettoyer. Le VHP agit à température ambiante, ne laisse aucun résidu et son cycle est contrôlé et enregistré.

Références

• WHO Laboratory Biosafety Manual, 4e édition (2020)
• CDC/NIH, Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL), 6e édition (2020)
• EN 17272:2020, Méthodes de désinfection des surfaces par voie aérienne au moyen d’un procédé automatisé
• EN 12469:2000, Biotechnology — Performance criteria for microbiological safety cabinets

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